Associées au publi rédactionnel Bausch+Lomb ULTRA® ONE DAY Multifocale : Cas Clinique - Dr Marie-Caroline Trône Les Cahiers d’Ophtalmologie - n° 286 - Juin /Juillet 2026 et au publi rédactionnel L’âge ne conditionne pas mon addition en lentilles souples multifocales ! - Dr Marie-Aude Lureau-Cornuot Les Cahiers d’Ophtalmologie - n° 287 - Septembre 2026
Ce test est basé sur la digestion de la paroi cellulaire de Micrococcus luteus dans une suspension. Ce substrat est sensible au lysozyme actif. Comme les parois cellulaires sont lysées par le lysozyme, la turbidité de la suspension de paroi cellulaire diminue. Cette diminution de la turbidité est mesurée en suivant la diminution de l’absorbance (à 450 nm) dans le temps à l’aide d’un spectrophotomètre. La diminution de la turbidité est une mesure relative de l’activité enzymatique. Lorsque la conformation du lysozyme change, il perd la capacité de perturber la paroi cellulaire du M. luteus. Par conséquent, l’activité enzymatique contre M. luteus peut être utilisée pour évaluer la conformation du lysozyme de la forme native active à la forme dénaturée inactive, l’activité enzymatique diminue Le témoin positif de cette étude est un phospholipide soluble dans l’eau. Lysozyme et phospholipides interagissent naturellement les uns avec les autres dans un film de larme stabilisé.
Méthode : Rugosité de surface par AFM. Trois lentilles de chaque type de lentille ont été rincées à l’eau Milli-Q afin de remplacer complètement la solution d’emballage. Les lentilles ont ensuite été écartelées à l’aide d’un scalpel propre et montées sur des lames de verre avec du ruban adhésif double face, ce qui a permis d’évaluer les surfaces des lentilles antérieures et postérieures. Après rinçage, les lentilles ont été séchées pendant la nuit dans une boîte sèche d’azote. Les lentilles sèches ont été analysées sur un microscope à force atomique Bruker ! . Les acquisitions ont été effectuées dans des zones de 50um x 50um et 5um x 5um en mode tapotement à l’aide d’une sonde ScanAsyst Air. Les données du carré moyen de la racine de rugosité (RMS ou Rq) ont été calculées à l’aide du logiciel d’analyse NanoScope de Bruker à partir des images 50um x 50um. Les données de Rq ont été mesurées à l’aide de deux acquisitions pour chaque section de lentille, soit un total de six acquisitions postérieures et six antérieures.
Méthodes : des cellules épithéliales cornéennes humaines transformées THCEpiC ont été ensemencés dans une plaque de 96 puits. Après incubation pendant 72 heures, le milieu de culture cellulaire a été aspiré et remplacé par 0,25 ml de milieu de controle de base frais. Les cellules en culture ont été incubées pendant 24 heures supplémentaires. Les cellules ont été incubées avec le milieu Epilife pendant 4 heures. Les cellules ont été lavées une fois avec 0,25 ml de milieu Epilife, puis exposées à un Epilife controle de base (315 mOsm/kg), ou à un Epilife hyperosmolaire ajusté avec 75 mM (450 mOsm/kg) ou 105 mM (500 mOsm/kg) ou 125 mM (530 mOsm/kg) de NaCNaCI en l’absence ou la présence d’osmoprotecteurs en combinaison pendant 18 - 24 heures. Chaque condition de traitement a été réalisée avec quatre répétitions et répétée dans trois essais distincts. L’érythritol et le glycérol ont été ajoutés au milieu de référence du milieu de contraste et au milieu hyperosmolaire pour obtenir une concentration finale de 0,9 % chacun. Après incubation, le surnageant de la culture cellulaire a été recueilli et stocké pour une analyse plus approfondie de la libération de cytokine/chimiokine/MMP-9. La viabilité cellulaire a été immédiatement déterminée par le test alamarBluern pour évaluer l’activité métabolique.
Conception de l'étude : L'étude était une étude randomisée sur 2 semaines avec 3 groupes parallèles, impliquant 36 chercheurs sur 36 sites aux États-Unis. L’étude comprenait une visite de dépistage/distribution (jour 1), une visite de suivi de deux semaines (jours 11 à 17) et une visite de sortie. Les sujets portaient des lentilles jetables quotidiennement et devaient compléter des questionnaires en ligne. Critères d'inclusion Les participants devaient être âgés de 18 à 40 ans, myopes, et porteurs habituels de lentilles en silicone hydrogel. Critères d'exclusion Les participants ne pouvaient pas avoir participé à une autre étude clinique récemment, ni avoir certaines conditions médicales ou utiliser certains médicaments.
Les lentilles tests ont été portées pendant 0, 1, 2, 4, 8, 12 et 16 heures par dix volontaires de la clinique avec une seule lentille utilisée pour chaque patient pour un total de dix lentilles pour chaque point temporel. Pour effectuer l’extraction, les lentilles ont été placées dans 2 ml de méthanol pendant 24 heures avec agitation à l’aide d’un shaker de laboratoire. Les lentilles zéro heure ont été retirées directement de la solution d’emballage et rincées à l’eau pendant 10 secondes, puis placées dans du méthanol pour l’extraction. Une méthode a été développée précédemment dans notre laboratoire pour analyser le tensioactif P181 avec l’extrait analysé directement par LCMS haute résolution. Cette méthode a été récemment écrite par une procédure de test de recherche. L’érythritol et le glycérol sont de petites molécules polaires difficiles à détecter à faible concentration par spectrométrie de masse. Afin d’améliorer la sensibilité et l’efficacité de l’ionisation, une méthode de dérivatisation au chlorure de benzoyle a été mise au point pour détecter les concentrations d’érythritol et de glycérol dans les échantillons d’extrait, selon des travaux publiés précédemment. Une procédure était nécessaire avec la capacité de préparer et de dérivatiser beaucoup d’échantillons dans un court laps de temps.